3、 指示病毒選擇

    指示病毒可分為“相關(guān)”病毒（如人血液制品可能攜帶的人類病毒 HAV、HBV、HIV 和 B19 等）、特異“模型”病毒（如 CHO 表達(dá)系統(tǒng)的 MVM、x-MuLV 病毒，桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的 BV 病毒等）和非特異“模型”病毒（如 CHO 表達(dá)系統(tǒng)的 PRV 和 Reo3 病毒）三類，應(yīng)優(yōu)先選擇與潛在污染病毒密切相關(guān)的病毒，如相關(guān)病毒不能獲取或不適于體外培養(yǎng)，可采用特異“模型”病毒代替。
    評價病毒清除的總能力時，應(yīng)選擇具有不同特性的非特異性模型病毒，包括 DNA/RNA、有/無包膜、顆粒大小、尤其對物理/化學(xué)處理明顯耐受的病毒等指示病毒需有足夠高的滴度，同時所選指示病毒不能對操作人員和環(huán)境造成生物危害。
    驗(yàn)證平臺擁有豐富的病毒毒種毒株，且背景清楚，純度高，滴度可達(dá) 8~9Log10/ml。表 1 列出了 CHO 表達(dá)制品工藝驗(yàn)證最常用四種指示病毒：

表 1 病毒清除工藝驗(yàn)證中常用指示病毒性質(zhì)

病毒名稱	病毒特性	檢測方法	病毒滴度 Log10/ml
Reo3（呼腸孤病毒）	雙鏈 RNA 病毒，無包膜，抗性中50-70nm	TCID50 Q-PCR	8-9
MVM（鼠細(xì)小病毒 ）	單鏈 DNA 病毒無包膜，抗性極高 18-26nm	TCID50 Q-PCR	8.5-9.5
PRV(偽狂病毒)	雙鏈 DNA 病毒有包膜，抗性中120-200nm	TCID50 Q-PCR	8-9
MuLv （鼠白血病病毒）	單鏈 RNA 病毒有包膜，抗性低 80-120nm	TCID50 Q-PCR	7.5-8.5
BV (桿狀病毒)	雙鏈 DNA病毒有包膜 45×275nm	TCID50 Q-PCR	8-9
POL-1 (人脊髓灰質(zhì)炎I型病毒)	單鏈 RNA 病毒無包膜，抗性中 25-30nm	TCID50	8-9
VSV (水皰性口炎病毒)	單鏈 RNA 病毒有包膜，抗性低 70×150nm	TCID50 Q-PCR	8-9
PPV （豬細(xì)小病毒）	單鏈 DNA 病毒無包膜，抗性高 18-24nm	TCID50 Q-PCR	7.5-8.5
HAdV-5 (人腺病毒5型)	雙鏈 DNA 病毒無包膜，抗性低 70-90nm	TCID50	8.5-9.5
BPIV-3 （牛副流感病毒3型）	單鏈 RNA 病毒有包膜，抗性低 150-200nm	TCID50	8-9