珈創(chuàng)生物 —— 生物技術(shù)服務(wù)與研發(fā)為一體的高新技術(shù)企業(yè)
優(yōu)質(zhì)高效透明
High quality, efficient and transparent
中國藥典要求對細胞系進行檢定，NMPA、FDA、EMA、世界衛(wèi)生組織（WHO） 和人類用藥注冊技術(shù)要求協(xié)調(diào)國際會議（ICH）的各種法規(guī)文件概述了對細胞庫檢定的要求和指導(dǎo)，以確認細胞的起源和歷史，并鑒定和測試細胞的身份，穩(wěn)定性和純度。
細胞檢定主要包括幾個方面：細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查、內(nèi)外源病毒因子檢查、成瘤性/致瘤性檢查等。
這些檢測項目對于 MCB 細胞和 WCB 細胞及生產(chǎn)限定代次細胞均適用。
我們建議在藥物生產(chǎn)的各個階段對哺乳動物和非哺乳動物細胞系進行檢定，包括：
主細胞庫（MCB） 工作細胞庫（WCB） 生產(chǎn)終末細胞（EOPC） 病毒種子庫（VSS） 原材料及最終產(chǎn)品
細胞系檢測
細胞鑒別試驗
新建細胞系/株、細胞庫和生產(chǎn)終末細胞應(yīng)進行鑒別試驗，以確定為本細胞，且無其他細胞的交叉污染。珈創(chuàng)生物提供多種鑒別試驗，客戶可選擇一種或多種方法對其細胞系/株進行種屬鑒別。
染色體核型分析
核型分析的結(jié)果可以確認樣品的細胞系身份和來源物種。我們擁有多種細胞（包括人源細胞，人源干細胞，猴 Vero，倉鼠 CHO）核型細胞分析的豐富經(jīng)驗。
染色體核型分析包括但不限于：中期染色體 G 顯帶分析和染色體計數(shù)（提供二倍體染色體數(shù)，頻率分布和多倍體水平）。
同工酶試驗
對細胞乳酸脫氫酶（LD）、6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PD）和核苷磷酸化酶 （NP）三種酶分別進行凝膠電泳試驗，并通過與指示細胞對比，確定有無交叉污染。
短串聯(lián)重復(fù)序列分析(STR)
STR（短串聯(lián)重復(fù)序列）分析法即通過提取樣品 DNA，PCR 擴增 STR 位點， PCR 產(chǎn)物檢測，檢測結(jié)果分析，并與 ATCC 和 DSMZ 數(shù)據(jù)庫進行比對，以確定樣品種屬來源，判斷其是否存在其他人源細胞交叉污染。
無菌檢查
參考中國藥典通則 1101，提供符合法規(guī)要求的薄膜過濾法和直接接種法。無菌檢查均在 A 級隔離器或 C+A 級環(huán)境中進行，且在檢測過程中持續(xù)進行環(huán)境監(jiān)測。
適用性檢查：均可按照法規(guī)的要求，對不同的供試品進行適用性試驗。 以確認所采用的方法適合供試品的無菌檢查。
薄膜過濾法：采用封閉式薄膜過濾器，可過濾大量供試品以及利于解決供試品中可能存在微生物生長抑制劑等問題。是可過濾供試品首選的檢測方法。
直接接種法：適用于無法用薄膜過濾法進行檢測的供試品，包括混懸液等非澄清水溶液、固體供試品、非水溶性供試品和滅菌醫(yī)療器械等。
分枝桿菌檢查
珈創(chuàng)生物參考中國藥典通則 1101，采用 Middlebrook 7H10 平板培養(yǎng)法，提供符合法規(guī)要求的分枝桿菌檢查。檢查均在A級隔離器或C+A級環(huán)境中進行，且在檢測過程中持續(xù)進行環(huán)境監(jiān)測。
支原體檢查
珈創(chuàng)生物參考中國藥典通則 3301，提供符合法規(guī)要求的支原體檢查包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA 染色法）。
培養(yǎng)法：供試品分別接種固體和液體培養(yǎng)基，于接種一周后取液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種進行次代培養(yǎng)，觀察初代培養(yǎng)和次代培養(yǎng)結(jié)果。
指示細胞培養(yǎng)法（DNA 染色法）：供試品接種于對照細胞，培養(yǎng) 3-5 天后傳代再培養(yǎng) 3-5 天，于培養(yǎng)期末進行染色觀察。
內(nèi)外源病毒污染檢查
檢查細胞系/株中是否有來源物種中潛在的可傳染的病毒，以及由于使用的原 材料或操作帶入的外源性病毒。細胞進行病毒檢查的種類及方法，須根據(jù)細胞種屬來源、組織來源、細胞特性、傳代歷史、培養(yǎng)方法及過程等確定。 在您開展檢測前，珈創(chuàng)愿意與您進行充分的溝通，確定合適的檢測方案。
細胞形態(tài)觀察及血吸附試驗
體外不同指示細胞接種培養(yǎng)法
動物體內(nèi)接種法
乳鼠腦內(nèi)及腹腔接種法
小鼠腦內(nèi)及腹腔接種法
豚鼠腹腔接種法
家兔皮內(nèi)及皮下接種法
雞胚接種法
雞胚卵黃囊接種法
雞胚尿囊腔接種及尿囊液血凝試驗
逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測
逆轉(zhuǎn)錄酶活性測定法 PERT
感染性試驗
透射電鏡觀察法
種屬特異性外源病毒因子檢測
應(yīng)根據(jù)細胞系/株種屬來源、組織來源及供體健康狀況等確定檢測病毒的種類。
鼠源細胞系
鼠源病毒檢查
人源細胞系/株
人源病毒檢測Q-PCR法
牛源性病毒檢測
細胞培養(yǎng)法
熒光抗體檢測法
豬源性病毒檢測
細胞培養(yǎng)法
普通PCR法
Q-PCR法
其他特定病毒檢測
鼠細小病毒檢測
細胞培養(yǎng)法
普通PCR法
Q-PCR法
杯狀病毒（Vesivirus 2117）檢測--Q- PCR法 CHO細胞系
成瘤性檢查
動物體內(nèi)接種法（裸鼠）
軟瓊脂克隆形成試驗
